Gα 12 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401264-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gα 12O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Gα 12 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Gα 12 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GNA12. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gα 12 Anticorpo (E-12): sc-515445
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gα 12 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401264-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gα 12 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401264-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNA12 codifica a subunidade alfa Gα12 da proteína G heterotrimérica humana, um transdutor-chave de sinais de múltiplos GPCRs para efetores a jusante que regulam a dinâmica do citoesqueleto e programas de transcrição. A Gα12 ativada comumente recruta RhoGEFs para estimular a sinalização de RhoA, influenciando a remodelação de actina, a forma celular, a adesão e a motilidade, e interagindo com as vias MAPK e outras vias de resposta ao estresse. Por meio dessas redes, GNA12 contribui para processos como transição epitélio–mesênquima, migração e controle da proliferação em diversos contextos celulares. Alterações na sinalização de Gα12 têm sido associadas a crescimento desregulado e fenótipos invasivos na biologia do câncer, bem como a anormalidades mais amplas na sinalização dependente de GPCR relevantes para modelos de pesquisa cardiovascular e inflamatória.
Gα 12 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GNA12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GNA12. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GNA12. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GNA12 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.