GSTT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420721
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GSTT1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GSTT1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GSTT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420721 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Gstt1** de camundongo codifica a **glutationa S-transferase teta 1 (GSTT1)**, uma enzima de desintoxicação de fase II que catalisa a conjugação de glutationa a uma variedade de xenobióticos eletrofílicos e metabólitos endógenos reativos. A GSTT1 contribui para a homeostase redox e para a defesa celular contra o estresse oxidativo ao facilitar a depuração de produtos de peroxidação lipídica e outros intermediários reativos. Sua atividade se interliga ao metabolismo da glutationa, às vias de resposta à carcinogênese química e a redes mais amplas de sinalização por eletrófilos/ROS que influenciam a adaptação celular ao estresse. Variações na função da família GSTT são frequentemente estudadas no contexto de sensibilidade a tóxicos, lesão tecidual associada à inflamação e modelos de biologia tumoral, nos quais a capacidade de desintoxicação pode modificar fenótipos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GSTT1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gstt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gstt1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gstt1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GSTT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gstt1 para a investigação da sinalização de GSTT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gstt1 críticos para a função GSTT1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gstt1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GSTT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GSTT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gstt1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GSTT1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GSTT1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gstt1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gstt1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.