GSKIP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412211-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GSKIPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GSKIP (h) e o Plasmídeo Double Nickase GSKIP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GSKIP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GSKIP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412211-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSKIP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412211-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GSKIP (proteína de interação com a GSK3β) codifica uma pequena proteína de andaime que se liga à glicogénio sintase quinase 3β e ajuda a posicionar esta quinase em complexos multiproteicos de sinalização. Ao modular eventos de fosforilação dependentes de GSK3, a GSKIP pode influenciar vias associadas à sinalização Wnt/β-catenina, à dinâmica de sinalização cAMP/PKA e, de forma mais ampla, ao controlo de decisões de destino celular, proliferação e programas de diferenciação. A regulação alterada de redes centradas na GSK3 está frequentemente associada a crescimento desregulado e fenótipos do desenvolvimento, tornando a GSKIP um nó útil para investigar a comunicação cruzada entre vias. Como proteína humana com funções de andaime de quinases, a GSKIP apoia estudos mecanísticos da especificidade e compartimentalização da sinalização em contextos celulares relevantes para a doença.
GSKIP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GSKIP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GSKIP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GSKIP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GSKIP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.