GSDMDC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406596-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GSDMDC1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GSDMDC1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GSDMDC1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GSDMD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GSDMDC1 Anticorpo (H-11): sc-393581
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GSDMDC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406596-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSDMDC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406596-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GSDMD codifica a gasdermina D, um efetor formador de poros que é ativado proteoliticamente a jusante da sinalização do inflamassoma e da clivagem por caspase-1/4/5/11 para executar a morte celular piroptótica. Após a ativação, o fragmento N-terminal oligomeriza na membrana plasmática para formar poros que promovem fluxo iônico, inchaço celular e liberação de mediadores pró-inflamatórios, como citocinas da família IL-1, conectando o reconhecimento imune inato a desfechos inflamatórios. Essa via se cruza com a sinalização de receptores de reconhecimento de padrões, o “priming” por NF-κB e a ativação do inflamassoma não canônico, moldando a defesa antimicrobiana e a inflamação estéril. A atividade desregulada da gasdermina D está implicada na biologia de doenças inflamatórias e infecciosas e é amplamente estudada em células mieloides, barreiras epiteliais e microambientes tumorais-imunes.
GSDMDC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GSDMD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GSDMD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GSDMD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GSDMD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.