GRSF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405858
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRSF-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GRSF-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRSF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405858 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GRSF1 codifica a GRSF-1, uma proteína de ligação a RNA enriquecida nas mitocôndrias que reconhece elementos de RNA ricos em guanina (G) e dá suporte ao controlo pós-transcricional da expressão génica mitocondrial. Participa no processamento, na estabilidade e na tradução do RNA mitocondrial, influenciando assim a fosforilação oxidativa, a função do ribossoma mitocondrial e a bioenergética celular. Por meio dessas funções, a GRSF-1 liga o metabolismo de RNA às respostas ao stress e à manutenção da homeostase mitocondrial. Alterações na atividade de GRSF1 têm sido investigadas em contextos de disfunção mitocondrial, incluindo neurodegeneração e remodelação metabólica associada ao cancro, nos quais programas de expressão génica mitocondrial são frequentemente perturbados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRSF-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRSF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRSF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRSF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRSF-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRSF1 para a investigação da sinalização de GRSF-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRSF1 críticos para a função GRSF-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRSF1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GRSF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GRSF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRSF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GRSF-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GRSF-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRSF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRSF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.