Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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group VI iPLA2 Plasmide Double Nickase (h): sc-402107-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- group VI iPLA2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il group VI iPLA2 Double Nickase Plasmid (h) e il group VI iPLA2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PLA2G6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: group VI iPLA2 Antibody (D-4): sc-376563
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
group VI iPLA2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
group VI iPLA2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLA2G6 codifica la iPLA2 di gruppo VI, una fosfolipasi A2 indipendente dal calcio che idrolizza i fosfolipidi di membrana generando acidi grassi liberi e lisofosfolipidi, modulando la segnalazione lipidica e il rimodellamento delle membrane. Questo enzima contribuisce all’omeostasi dei fosfolipidi, all’integrità mitocondriale, al traffico vescicolare e alla biologia dei mediatori dell’infiammazione attraverso vie legate all’acido arachidonico. L’attività di PLA2G6 interseca le risposte allo stress ossidativo e la morte cellulare programmata, influenzando la suscettibilità cellulare alla perossidazione lipidica e alla disfunzione degli organelli. Alterazioni genetiche di PLA2G6 sono associate a neurodegenerazione con accumulo di ferro nel cervello e a fenotipi parkinsoniani correlati a esordio precoce, a supporto della sua rilevanza per gli studi sulla manutenzione neuronale e sul metabolismo lipidico.
group VI iPLA2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PLA2G6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PLA2G6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PLA2G6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PLA2G6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.