GRK 4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402816-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRK 4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRK 4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GRK 4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRK4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRK 4 Anticorpo (D-11): sc-376891
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRK 4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402816-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GRK 4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402816-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRK4 codifica a quinase 4 de receptores acoplados à proteína G (G protein–coupled receptor kinase 4), uma quinase de serina/treonina que fosforila GPCRs ativados para promover o recrutamento de β-arrestina, a dessensibilização do receptor e a internalização. Ao modular a cinética de sinalização de GPCRs, a GRK4 pode influenciar vias de segundos mensageiros, incluindo cAMP/PKA, e as respostas transcricionais a jusante, moldando saídas de sinalização específicas de cada tipo celular e tecido. Em humanos, a GRK4 tem sido estudada em relação à regulação de receptores de dopamina e a vias de controle do manuseio de sódio, o que sustenta sua relevância para a fisiologia cardiovascular e renal. A atividade ou a expressão desregulada de GRK4 tem sido associada a alterações na responsividade do receptor e a viés de sinalização, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos do controle de redes de GPCR.
GRK 4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRK4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRK4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRK4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRK4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.