Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GRK 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402816
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRK 4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GRK 4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRK 4 Anticorpo (D-11): sc-376891
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRK 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402816 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GRK4 codifica a quinase 4 de receptores acoplados à proteína G (GRK4), uma quinase de serina/treonina que fosforila GPCRs ativados para promover o recrutamento de β-arrestina, a dessensibilização do receptor e o tráfego intracelular. A atividade de GRK4 influencia a dinâmica de sinalização em vias ligadas a cAMP/PKA e a saídas downstream de MAPK, ao modular a intensidade e a duração das respostas mediadas por receptores. Em contextos relevantes para rim e vasculatura, a GRK4 tem sido estudada pelos seus efeitos na regulação de receptores dopaminérgicos e no manuseio de sódio, conectando-a a fenótipos de regulação da pressão arterial. Alterações na expressão de GRK4 ou variantes funcionais têm sido associadas a áreas de pesquisa cardiovascular e renal nas quais a homeostase da sinalização por GPCR está perturbada.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRK 4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRK4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRK4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRK4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRK 4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRK4 para a investigação da sinalização de GRK 4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRK4 críticos para a função GRK 4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRK4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GRK 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GRK 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRK4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GRK 4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GRK 4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRK4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRK4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.