GRK 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403415-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRK 3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRK 3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GRK 3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRK3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRK 3 Anticorpo (C-11): sc-365197
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRK 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403415-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GRK 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403415-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRK3 (também conhecido como ADRBK2) codifica a quinase 3 de receptores acoplados à proteína G, uma quinase de serina/treonina que fosforila GPCRs ativados para promover o recrutamento de β-arrestina, a dessensibilização do receptor e o tráfego endocítico. Por meio desse eixo canônico GRK–arrestina, a GRK3 modula a intensidade e a duração da sinalização a jusante por segundos mensageiros, incluindo as vias cAMP/PKA e MAPK/ERK, e pode influenciar respostas de receptores de quimiocinas e de neurotransmissores. A atividade da GRK3 integra-se a redes mais amplas que controlam a terminação do sinal, a ressensibilização do receptor e decisões de sinalização enviesada (biased signaling). A dessensibilização de GPCRs desregulada e alterações na expressão ou função de GRK3 têm sido investigadas no contexto de fenótipos neuropsiquiátricos, migração de células imunes e reprogramação de sinalização associada ao câncer, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos focados em vias.
GRK 3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRK3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRK3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRK3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.