Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
granzyme B Antibody (GRB7): sc-73620. Western blot analysis of granzyme B expression in NK-92 whole cell lysate.
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granzyme B双切口酶质粒(h): sc-401469-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- granzyme B 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- granzyme B双切酶质粒（h）和granzyme B双切酶质粒（h2）编码针对GZMB的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：granzyme B: sc-8022，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
granzyme B双切口酶质粒(h) | sc-401469-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
granzyme B双切口酶质粒(h2) | sc-401469-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 GZMB 基因编码颗粒酶 B（granzyme B），这是一种丝氨酸蛋白酶，储存在 CD8+ T 细胞和 NK 细胞的细胞毒性颗粒中，在穿孔素介导递送进入靶细胞后，驱动靶细胞发生凋亡。进入细胞质后，颗粒酶 B 通过切割并激活半胱天冬酶（caspases）和 BID，启动内源性与外源性凋亡信号通路，从而将免疫效应功能与程序性细胞死亡通路连接起来。GZMB 的活性还可通过加工细胞内底物以及在免疫监视过程中调节细胞—细胞相互作用，促进炎症性微环境的形成。颗粒酶 B 的表达或活性失调与免疫介导的组织损伤及抗肿瘤免疫改变相关，因此常作为研究细胞毒性淋巴细胞功能的重点靶标。
granzyme B 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GZMB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GZMB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GZMB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GZMB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。