GPR40 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401434-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR40O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR40 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR40 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FFAR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR40 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401434-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR40 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401434-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FFAR1 codifica o GPR40, um GPCR da classe A sensível a lipídios, altamente responsivo a ácidos graxos livres de cadeia média e longa. Após a ativação, o GPR40 acopla-se principalmente à Gαq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase C, elevar o Ca2+ intracelular e acionar vias dependentes de PKC que modulam o acoplamento estímulo–secreção e redes mais amplas de sinalização metabólica. Em tecidos humanos, a atividade de FFAR1 está intimamente ligada à regulação, induzida por nutrientes, da homeostase endócrina e metabólica, com conexões de pesquisa envolvendo a função de células β, a dinâmica de secreção de insulina e a adaptação da sinalização induzida por lipídios. A desregulação da detecção de ácidos graxos e da sinalização downstream dependente de Ca2+ tem sido estudada no contexto de mecanismos de doenças metabólicas, incluindo diabetes tipo 2 e resistência à insulina associada à obesidade, bem como remodelamento metabólico ligado à inflamação.
GPR40 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FFAR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FFAR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FFAR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FFAR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.