GPR22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-428483

概要

Gpr22は、オーファンGタンパク質共役受容体であるGPR22をコードしており、主に心臓および血管の生物学分野で研究されています。GPR22は、ストレス応答性シグナル伝達の制御や細胞リモデリングプログラムと関連づけられています。内因性リガンドは依然として不明ですが、GPCR様の共役機構から、転写応答、代謝、収縮機能を形作るcAMP/PKA系やMAPKシグナル伝達などのセカンドメッセンジャー経路に影響を与える可能性が示唆されます。マウスモデルや発現解析では、GPR22は心肥大や心不全に関連するリモデリングなどの心血管表現型と関連しており、心筋細胞や血管細胞の恒常性における役割の解明が進められています。さらにGpr22は、組織特異的な転写プロファイリングにおけるマーカーとしても用いられ、GPCRシグナルの状態を疾患関連の遺伝子ネットワークと結び付けるために利用されています。

GPR22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGpr22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gpr22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gpr22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gpr22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR22の機能に不可欠なGpr22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gpr22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGPR22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gpr22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR22 HDRプラスミド（m）および GPR22 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGpr22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGpr22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。