Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GM2/GD2 Synthase双切口酶质粒(h): sc-403592-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GM2/GD2 Synthase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GM2/GD2 Synthase双切酶质粒（h）和GM2/GD2 Synthase双切酶质粒（h2）编码针对B4GALNT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GM2/GD2 Synthase: sc-376505，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GM2/GD2 Synthase双切口酶质粒(h) | sc-403592-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GM2/GD2 Synthase双切口酶质粒(h2) | sc-403592-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
B4GALNT1 编码 GM2/GD2 合酶，这是一种定位于高尔基体的 β1,4-N-乙酰半乳糖胺基转移酶，能够催化由乳糖基神经酰胺衍生的神经节苷脂转化为 GM2 和 GD2，从而塑造质膜上糖鞘脂的组成。通过调控神经节苷脂的生物合成，该酶会影响膜微区的组织、受体信号传导以及细胞—细胞相互作用，将糖基化状态与控制黏附和信号转导的通路联系起来。神经节苷脂谱的改变以及 B4GALNT1 活性的变化与神经发育和神经退行性表型的改变有关；在人们研究糖鞘脂重塑如何影响细胞身份与应激反应的情境中，也经常会考察它。作为糖脂代谢中的关键节点酶，B4GALNT1 是解析糖链结构如何调控蛋白运输、免疫识别和表面抗原呈递的有用靶点。
GM2/GD2 Synthase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 B4GALNT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对B4GALNT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏B4GALNT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了B4GALNT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。