Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GLUD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402187-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GLUD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GLUD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GLUD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GLUD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GLUD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLUD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLUD1 codifica a glutamato desidrogenase mitocondrial 1, uma enzima que catalisa a desaminação oxidativa reversível do glutamato em α-cetoglutarato e amónia, ligando o catabolismo de aminoácidos ao ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) e à bioenergética celular. Ao regular o nó glutamato/α-cetoglutarato, a GLUD1 influencia o metabolismo do azoto, o equilíbrio redox e o fluxo anaplerótico que sustenta o metabolismo oxidativo. A sua atividade cruza-se com vias que controlam a secreção de insulina e a homeostase de neurotransmissores através do acoplamento do metabolismo do glutamato à produção de ATP e à função mitocondrial. A desregulação de GLUD1 tem sido associada a distúrbios do metabolismo de aminoácidos e a fenótipos neuroendócrinos, tornando-a um alvo relevante para estudar o controlo metabólico em células humanas.
GLUD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GLUD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GLUD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GLUD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GLUD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.