GLP-1R Lentiviral Activation Particles (h): sc-400847-LAC

GLP1Rは、グルカゴン様ペプチド-1受容体（GLP-1R）をコードしており、主にGαsに共役してcAMPを上昇させ、PKA/EPACシグナル伝達を活性化するクラスBのGPCRです。下流では、CREB依存的な転写、細胞内カルシウム動態の調節、さらにMAPK/ERKおよびPI3K/AKTとの経路クロストークが起こり、これらが細胞の興奮性、分泌、代謝関連遺伝子プログラムを形作ります。膵島の生物学においては、GLP-1Rシグナルがグルコース刺激によるインスリン分泌を増強し、β細胞の機能的応答を支えます。一方、膵外組織では神経内分泌および消化管のシグナル伝達に寄与します。GLP1Rの発現やシグナル伝達の変化は、糖尿病および肥満研究に関連する代謝制御異常の表現型に関与するとされており、ヒト細胞系におけるcAMP駆動性の転写制御機構を研究するための機序的な手がかりも提供します。

GLP-1R レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なGLP1Rの発現上昇を可能にします。

GLP-1R レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、GLP1R転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性GLP-1Rの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のGLP1Rゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。