Ggta1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420545
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ggta1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Ggta1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ggta1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420545 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ggta1 codifica a alfa-1,3-galactosiltransferase 1, uma glicosiltransferase localizada no complexo de Golgi que catalisa a transferência de galactose para gerar o epítopo Galα1-3Gal em glicoproteínas e glicolipídios. Ao moldar as estruturas terminais de glicanos, Ggta1 influencia a maturação proteica, a glicosilação de membrana e as interações célula–célula ou célula–matriz, que podem afetar o reconhecimento imune e a sinalização inflamatória. Em camundongos, a atividade de Ggta1 é relevante para estudos de biologia de xenoantígenos e de respostas mediadas por complemento/anticorpos, e serve como modelo para mecanismos de imunidade dependentes de glicosilação. Assim, a inativação dessa enzima é útil para investigar como epítopos de glicanos regulam a ligação a receptores, a compatibilidade tecidual e vias imunes a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ggta1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ggta1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ggta1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ggta1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ggta1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ggta1 para a investigação da sinalização de Ggta1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ggta1 críticos para a função Ggta1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ggta1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Ggta1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Ggta1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ggta1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Ggta1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Ggta1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ggta1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ggta1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.