GGPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404003

概要

GGPS1はゲラニルゲラニル二リン酸合成酵素1をコードしており、ゲラニルゲラニル二リン酸（GGPP）という必須のイソプレノイド脂質前駆体を産生するメバロン酸経路の中核酵素です。GGPPはタンパク質プレニル化を支え、RAS、RHO、RABファミリーなどの低分子量GTPアーゼが膜に結合してシグナル伝達活性を発揮できるようにします。これにより、小胞輸送、細胞骨格ダイナミクス、増殖に影響を与えます。イソプレノイドのフラックスとプレニル化能を調節することで、GGPS1はミトコンドリアや小胞体（ER）関連プロセスの代謝的制御に寄与し、コレステロールおよびドリコール生合成とも交差します。メバロン酸—プレニル化軸の破綻やGGPS1活性の変化は、がん原性シグナル伝達における依存性や、脂質代謝・タンパク質輸送に関わるその他の疾患と関連づけられています。

GGPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGGPS1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GGPS1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GGPS1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GGPS1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GGPS1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GGPS1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GGPS1の機能に不可欠なGGPS1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GGPS1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GGPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGGPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GGPS1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GGPS1 HDRプラスミド（h）および GGPS1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGGPS1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGGPS1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。