非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
GFAT1 抗体 (D-9): sc-377479. SJRH30 (A) 和 Hs 732. Sk/Mu (B) 全细胞裂解液中 GFAT1 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
GFAT1双切口酶质粒(h): sc-403022-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GFAT1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GFAT1双切酶质粒（h）和GFAT1双切酶质粒（h2）编码针对GFPT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GFAT1: sc-377479，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GFAT1双切口酶质粒(h) | sc-403022-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GFAT1双切口酶质粒(h2) | sc-403022-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GFPT1 编码谷氨酰胺—果糖-6-磷酸酰胺转移酶 1（GFAT1），这是己糖胺生物合成通路的限速酶，催化果糖-6-磷酸与谷氨酰胺生成氨基葡萄糖-6-磷酸。通过调控代谢通量以推动 UDP-GlcNAc 的生成，GFAT1 影响蛋白质的 N-糖基化与 O-GlcNAc 修饰、内质网（ER）蛋白质质量控制，以及与葡萄糖和氨基酸可用性相关的代谢感知。该通路与胰岛素信号、应激反应及糖蛋白合成交叉，使 GFPT1 成为连接营养状态与翻译后修饰及细胞稳态的关键节点。在与人类疾病相关的情境中，GFPT1 活性及己糖胺通路输出的改变，已与先天性肌无力综合征以及糖基化失衡和代谢表型异常相关。
GFAT1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GFPT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GFPT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GFPT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GFPT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。