GDF-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406826

概要

GDF10は、細胞分化の制御、組織パターニング、ならびに細胞外マトリックスのリモデリングに関与するとされる、分泌性のTGF-βスーパーファミリーリガンドである成長分化因子10（GDF-10）をコードします。GDF-10はセリン／スレオニンキナーゼ受容体を介してシグナル伝達を行い、SMAD依存性の正統的（カノニカル）な転写プログラムを作動させるとともに、細胞運命決定や間質応答を形作る、より広範なTGF-β／BMP経路間のクロストークとも交差します。文献上では、GDF10発現の変化が、発生過程の制御異常や、線維化および腫瘍関連微小環境に関係する異常なリモデリング・プログラムと関連付けられています。in vitroでは、GDF-10はヒト細胞モデルにおいて、系譜決定（リネージュ・コミットメント）、遊走、ならびに状況依存的な増殖制御への影響を評価する目的で、しばしば研究対象となっています。

GDF-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGDF10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GDF10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GDF10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GDF-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GDF-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GDF10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GDF-10の機能に不可欠なGDF10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GDF10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GDF-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGDF-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GDF10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GDF-10 HDRプラスミド（h）および GDF-10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGDF10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGDF10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。