GBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402140

概要

グアニル酸結合タンパク質2（GBP2）は、インターフェロン誘導性の大型GTPアーゼであり、細胞内在性防御および炎症関連シグナル伝達に関与するとされています。GBP2は細胞質および膜系コンパートメントに局在し、インターフェロン刺激遺伝子（ISG）ネットワークへの関与、病原体制限プロセスの制御、ならびに免疫シグナル伝達経路の調節に寄与します。その活性は、自然免疫の活性化を起点として、細胞ストレス応答、サイトカイン駆動性の転写プログラム、細胞内膜の再構築といった下流の影響へと結び付けます。GBP2発現の破綻やインターフェロン経路の関与は、炎症状態や免疫腫瘍学（イムノオンコロジー）的表現型と関連付けられており、GBP2は宿主応答および免疫制御の機序研究に有用な結節点となります。

GBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGBP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GBP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GBP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GBP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GBP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GBP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GBP2の機能に不可欠なGBP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GBP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGBP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GBP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GBP2 HDRプラスミド（h）および GBP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGBP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGBP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。