Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Gas6 Plasmide Double Nickase (h): sc-400978-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Gas6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Gas6 Double Nickase Plasmid (h) e il Gas6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GAS6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Gas6 Antibody (A-9): sc-376087
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Gas6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400978-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gas6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400978-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene growth arrest–specific 6 (GAS6) codifica Gas6, un ligando secreto dipendente dalla vitamina K per le tirosin-chinasi recettoriali della famiglia TAM AXL, MERTK e TYRO3. La segnalazione Gas6–TAM regola l’efferocitosi, l’omeostasi dell’immunità innata, la funzione piastrinica e i programmi di sopravvivenza cellulare attraverso vie che includono PI3K–AKT, MAPK/ERK e NF-κB, con effetti dipendenti dal contesto su proliferazione e migrazione. In molti tessuti, un’attività alterata dell’asse GAS6/AXL è stata associata a rimodellamento infiammatorio, fibrosi e segnalazione correlata ai tumori, rendendo GAS6 un bersaglio frequente negli studi sul dialogo tra microambiente e cellule. In quanto fattore secreto, Gas6 rappresenta anche un nodo sperimentalmente accessibile per analizzare le dinamiche recettore‑ligando e la regolazione paracrina in modelli di co-coltura e di mezzo condizionato.
Gas6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GAS6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GAS6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GAS6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GAS6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.