Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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G9a Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402484-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- G9aO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase G9a (h) e o Plasmídeo Double Nickase G9a (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EHMT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:G9a Anticorpo (C-9): sc-515726
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
G9a Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402484-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
G9a Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402484-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EHMT2 codifica a metiltransferase de lisina G9a, um dos principais “writers” de H3K9me1/2, que estabelece cromatina repressiva e sustenta o silenciamento génico estável ao longo do desenvolvimento e da especificação de linhagens. A G9a atua em complexos epigenéticos nucleares para coordenar a organização da cromatina, programas de transcrição, respostas a danos no DNA e a comunicação cruzada com outras vias de metilação de histonas e do DNA. Alterações na atividade de EHMT2/G9a têm sido associadas à desregulação transcricional generalizada observada na biologia do cancro, a fenótipos do neurodesenvolvimento e à sinalização inflamatória, tornando-a um nó comum em estudos de plasticidade epigenética. Investigar a metilação de H3K9 dependente de G9a ajuda a definir como o estado da cromatina influencia a proliferação, a diferenciação e redes transcricionais adaptativas ao stress em células humanas.
G9a O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EHMT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EHMT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EHMT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EHMT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.