Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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G9a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430994
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- G9a O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico G9a, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:G9a Anticorpo (C-9): sc-515726
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
G9a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430994 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Ehmt2** de camundongo codifica a metiltransferase de lisina em histonas **G9a**, uma das principais enzimas responsáveis pela mono- e dimetilação de **H3K9**, que ajuda a estabelecer estados de cromatina repressivos ao longo da eucromatina. A G9a coordena programas de silenciamento transcricional envolvidos no desenvolvimento embrionário, no compromisso de linhagem e na manutenção da identidade celular ao atuar em parceria com reguladores de cromatina como **GLP (EHMT1)** e fatores associados à heterocromatina. Por meio de seus efeitos sobre a acessibilidade da cromatina e a expressão gênica, a **EHMT2** influencia respostas a danos no DNA, o timing de replicação e a estabilidade epigenética. A atividade desregulada de G9a e os padrões de **H3K9me2** são amplamente estudados no contexto da biologia tumoral, de fenótipos do neurodesenvolvimento e da regulação de genes inflamatórios, tornando **Ehmt2** um nó central para pesquisas focadas em epigenética.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO G9a (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ehmt2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ehmt2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ehmt2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína G9a.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ehmt2 para a investigação da sinalização de G9a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ehmt2 críticos para a função G9a
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ehmt2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo G9a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo G9a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ehmt2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo G9a Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR G9a (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ehmt2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ehmt2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.