Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Gα i-1 Antibody (B-11): sc-515658. Western blot analysis of Gα i-1 expression in human brain tissue extract.
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Gα i-1/GNAI1双切口酶质粒(h): sc-400652-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Gα i-1/GNAI1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Gα i-1/GNAI1双切酶质粒（h）和Gα i-1/GNAI1双切酶质粒（h2）编码针对GNAI1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Gα i-1/GNAI1: sc-13533，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Gα i-1/GNAI1双切口酶质粒(h) | sc-400652-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gα i-1/GNAI1双切口酶质粒(h2) | sc-400652-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNAI1 编码抑制性 G 蛋白 α 亚基 Gαi-1，是异源三聚体 G 蛋白的核心组成部分，负责将来自 GPCR 的信号传递至下游效应器。受体被激活后，Gαi-1 可抑制腺苷酸环化酶活性、降低 cAMP 水平，并通过 Gα 与 Gβγ 两条输出通路调控离子通道功能及激酶信号（包括 PI3K/AKT 和 MAPK 通路的关键节点）。这些信号程序在多种细胞类型中调控增殖、分化、分泌以及趋化迁移。GPCR–G 蛋白偶联失调与 cAMP 依赖性信号的改变已被认为与肿瘤相关信号重编程、炎症反应及神经系统表型有关，因此 GNAI1 是进行通路解析的有用靶点。
Gα i-1/GNAI1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GNAI1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GNAI1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GNAI1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GNAI1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。