FXR/NR1H4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417410-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FXR/NR1H4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FXR/NR1H4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FXR/NR1H4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NR1H4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FXR/NR1H4 Anticorpo (D-3): sc-25309
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FXR/NR1H4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417410-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FXR/NR1H4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417410-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NR1H4 codifica o receptor X farnesoide (FXR), um receptor nuclear ativado por ácidos biliares que atua como fator de transcrição dependente de ligante, controlando a síntese, o transporte e a desintoxicação de ácidos biliares. Em hepatócitos e enterócitos, o FXR coordena programas metabólicos e inflamatórios por meio de vias que incluem a regulação de CYP7A1 pelo eixo FXR–SHP, a indução de transportadores de exportação e captação de sais biliares e a interação com a sinalização de FGF19/FGF15. Ao integrar a homeostase de ácidos biliares ao metabolismo de lipídios e glicose, o FXR influencia respostas ao estresse celular, a função de barreira e a modulação imune no eixo intestino–fígado. A desregulação da sinalização do FXR está associada a fenótipos hepáticos colestáticos e metabólicos e é estudada em contextos como esteato-hepatite, progressão de fibrose e biologia de tumores hepatobiliares.
FXR/NR1H4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NR1H4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NR1H4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NR1H4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NR1H4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.