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FUS/TLS慢病毒激活颗粒(h) | sc-400612-LAC | 200 µl | $455.00 |
FUS(FUS/TLS)编码一种RNA/DNA结合蛋白,可将转录调控与pre‑mRNA剪接、mRNA转运以及应激颗粒动态过程耦联。FUS通过协调DNA损伤应答与修复参与基因组维护,其中包括与双链断裂信号传导相关的通路;同时,它还会影响与RNA聚合酶II相关的转录程序。借助其低复杂度结构域,FUS能够发生相分离,从而塑造核糖核蛋白复合体的组装,并影响神经元蛋白稳态。FUS的失调或突变与神经退行性疾病的发生机制密切相关,尤其是肌萎缩侧索硬化症(ALS)和额颞叶痴呆(FTD);此外,在基因组不稳定性以及与肉瘤相关的融合致癌基因背景中也有研究关注。
FUS/TLS 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FUS 表达。
FUS/TLS 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FUS转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性FUS/TLS表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FUS 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。