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Furin慢病毒激活颗粒(h) | sc-400904-LAC | 200 µl | $455.00 |
FURIN 编码 furin,这是一种钙依赖性的前体蛋白转化酶,在反式高尔基网络与内体区室之间循环,通过蛋白水解方式激活多种带有成对碱性基序的前体蛋白。通过调控生长因子、受体、黏附分子和蛋白酶等的成熟过程,furin 维持分泌蛋白与膜蛋白的稳态,并影响与细胞外基质重塑、免疫信号传导和细胞分化相关的通路。FURIN 活性失调与蛋白稳态改变以及信号组分异常加工有关,常见于肿瘤生物学、炎症与传染病研究等情境。作为前体蛋白加工的关键枢纽,FURIN 为研究“前体切割如何控制细胞表面组成及其下游信号输出”提供了机制层面的切入点。
Furin 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FURIN 表达。
Furin 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FURIN转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Furin表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FURIN 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。