FTα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403920-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FTαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FTα (h) e o Plasmídeo Double Nickase FTα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FNTA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FTα Anticorpo (D-5): sc-374262
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FTα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403920-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FTα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403920-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FNTA codifica a subunidade alfa da farnesiltransferase (FTα), que forma um heterodímero obrigatório com a subunidade beta para catalisar a farnesilação de proteínas, uma modificação lipídica isoprenoide C15 em motivos CAAX na extremidade C-terminal. Esse processamento pós-traducional favorece a associação à membrana e o tráfego subcelular de diversas proteínas de sinalização, incluindo membros da superfamília RAS, influenciando assim a sinalização MAPK, a organização do citoesqueleto, a dinâmica de vesículas e a progressão do ciclo celular. A atividade de FTα conecta a via do mevalonato/biossíntese de isoprenoides à proteostase e à transdução de sinais ao permitir a localização estável e a função de substratos prenilados. A prenilação desregulada e o processamento alterado dependente de FNTA têm sido associados a sinalização de crescimento aberrante e vias oncogênicas, tornando FNTA um alvo útil para dissecar o comportamento de redes dependentes de prenilação em células humanas.
FTα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FNTA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FNTA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FNTA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FNTA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.