FRAT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406802

Visão geral

FRAT2 (Frequently rearranged in advanced T-cell lymphomas 2) codifica uma proteína citoplasmática que modula a sinalização canônica Wnt/β-catenina ao interagir com a GSK3β e influenciar a estabilidade da β-catenina e os programas transcricionais a jusante. Por meio dessa via, FRAT2 contribui para a regulação da proliferação e diferenciação celulares e do padrão de desenvolvimento, e pode se cruzar com redes de sinalização mais amplas que controlam a progressão do ciclo celular e decisões de destino celular. A atividade alterada da via Wnt está implicada em múltiplos contextos de doença, incluindo transformação oncogênica e remodelamento tecidual, o que torna FRAT2 um nó útil para dissecar a expressão gênica dependente de β-catenina. A investigação funcional de FRAT2 dá suporte a estudos mecanísticos de crosstalk entre vias e de regulação dependente do contexto em sistemas celulares humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FRAT2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FRAT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FRAT2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FRAT2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FRAT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FRAT2 para a investigação da sinalização de FRAT2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FRAT2 críticos para a função FRAT2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FRAT2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FRAT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FRAT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FRAT2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FRAT2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FRAT2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FRAT2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FRAT2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.