FRAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406922

Visão geral

FRAT1 (frequentemente rearranjado em linfomas de células T avançados 1) codifica um regulador positivo da via Wnt/β-catenina que promove a saída de sinalização por meio da inibição de eventos de fosforilação dependentes de GSK3, estabilizando assim a β-catenina e intensificando programas transcricionais ligados à proliferação e à diferenciação. Ao modular componentes citoplasmáticos e nucleares da sinalização Wnt, FRAT1 influencia decisões de destino celular, progressão do ciclo celular e o controle, dependente do contexto, da migração. Alterações na expressão de FRAT1 foram relatadas em múltiplos tipos de tumor e ele é frequentemente estudado como um nó que conecta a atividade da via Wnt a redes transcricionais oncogênicas. Portanto, FRAT1 é relevante para dissecar a comunicação cruzada entre vias que afeta estados semelhantes aos de células-tronco, programas associados à transição epitélio–mesênquima e a regulação transcricional dependente de sinal em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FRAT1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FRAT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FRAT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FRAT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FRAT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FRAT1 para a investigação da sinalização de FRAT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FRAT1 críticos para a função FRAT1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FRAT1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FRAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FRAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FRAT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FRAT1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FRAT1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FRAT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FRAT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.