folliculin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403316-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- folliculinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase folliculin (h) e o Plasmídeo Double Nickase folliculin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FLCN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:folliculin Anticorpo (D-4): sc-271558
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
folliculin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403316-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
folliculin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403316-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O FLCN codifica a foliculina, uma proteína associada à supressão tumoral que coordena a detecção de nutrientes, a sinalização lisossomal e o metabolismo celular por meio de interações com FNIP1/2 e da regulação das vias AMPK–mTORC1 e das GTPases Rag. A foliculina contribui para o controle da autofagia, a homeostase mitocondrial e programas transcricionais ligados a TFEB/TFE3, influenciando a biogênese de lisossomos e as respostas ao estresse. Variantes de perda de função em FLCN estão implicadas na síndrome de Birt–Hogg–Dubé e associam-se à predisposição a tumores renais e à formação de cistos pulmonares, tornando o FLCN um nó central para o estudo de mecanismos de genótipo para fenótipo. A modulação experimental da foliculina apoia investigações sobre homeostase energética, controle do crescimento celular e diferenciação epitelial relevantes para a biologia das doenças.
folliculin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FLCN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FLCN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FLCN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FLCN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.