FNIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409140

概要

FNIP2（folliculin interacting protein 2）は、腫瘍抑制因子FLCNの細胞質における結合パートナーであり、栄養感知およびエネルギー恒常性に関わるシグナル伝達で機能します。AMPK–mTOR軸の制御に寄与し、アミノ酸の利用可能性を代謝適応へと結び付けるリソソーム関連プロセスにも関与しており、その下流でオートファジーや細胞増殖制御に影響を及ぼします。FLCNおよび関連複合体との相互作用を介して、FNIP2は代謝活動の高い組織におけるミトコンドリア機能やストレス応答にも影響します。FLCN–FNIPシグナルの破綻は、遺伝性の腫瘍素因に関与する経路や、より広範な代謝疾患メカニズムに関連する経路と結び付けられており、細胞増殖と恒常性の研究における重要性が示されています。

FNIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFNIP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FNIP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FNIP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FNIP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FNIP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FNIP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FNIP2の機能に不可欠なFNIP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FNIP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FNIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFNIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FNIP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FNIP2 HDRプラスミド（h）および FNIP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFNIP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFNIP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。