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FMR1双切口酶质粒(h) | sc-401919-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FMR1双切口酶质粒(h2) | sc-401919-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FMR1 编码脆性 X 智力障碍蛋白(FMRP),这是一种 RNA 结合蛋白,负责调控 mRNA 的运输、稳定性与翻译,尤其是在神经元突触处。FMRP 与多聚核糖体及核糖核蛋白颗粒相互作用,以调节依赖活动的局部蛋白合成,从而支持突触发育、可塑性以及树突棘成熟。通过控制与信号传导相关的翻译程序,FMR1 与参与突触功能和神经元分化的多条通路发生交叉。FMR1 表达的缺失或失调与脆性 X 相关的神经发育表型密切相关,因此它是研究 RNA 代谢机制与突触生物学的重要靶点。
FMR1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FMR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FMR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FMR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FMR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。