Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Flk-1/KDR/VEGFR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400118-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Flk-1/KDR/VEGFR2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Flk-1/KDR/VEGFR2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Flk-1/KDR/VEGFR2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KDR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Flk-1/KDR/VEGFR2 Anticorpo (D-8): sc-393163
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Flk-1/KDR/VEGFR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400118-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Flk-1/KDR/VEGFR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400118-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KDR codifica o receptor tirosina-quinase Flk-1/KDR/VEGFR2, um receptor de sinalização principal para ligantes de VEGF em células endoteliais vasculares. A dimerização e a autofosforilação induzidas por ligante ativam as vias PI3K–AKT, RAS–RAF–MEK–ERK, PLCγ–PKC e da família SRC, coordenando a proliferação, migração, sobrevivência endotelial e a permeabilidade vascular durante a angiogênese e a vasculogênese. A sinalização via VEGFR2 também se conecta à produção de óxido nítrico e a programas de remodelamento do citoesqueleto que moldam a maturação e o brotamento dos vasos. A atividade e a expressão desreguladas de KDR são amplamente estudadas na angiogênese tumoral, em respostas neovasculares associadas à isquemia e no remodelamento vascular inflamatório.
Flk-1/KDR/VEGFR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KDR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KDR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KDR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KDR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.