fibrillin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406714

概要

FBN2はフィブリリン2をコードしており、フィブリリン2は細胞外マトリックスに存在する大型の糖タンパク質で、重合してマイクロフィブリルを形成し、弾性線維の組み立てや結合組織の構築に寄与します。フィブリリン2を含むマイクロフィブリルは構造的支持を担うと同時に、増殖因子の利用可能性（バイオアベイラビリティ）を調節し、形態形成や組織恒常性を司るTGF-βやBMPなどのシグナル伝達経路に影響を与えます。インテグリンやマトリックス関連タンパク質との相互作用を介して、フィブリリン2は細胞接着、メカノトランスダクション、ならびに細胞外マトリックスのリモデリングを調節します。FBN2の遺伝学的な異常は先天性の結合組織の表現型と関連しており、発生におけるマトリックス生物学や増殖因子シグナルの破綻に関する研究において重要です。

fibrillin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFBN2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FBN2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FBN2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、fibrillin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、fibrillin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FBN2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• fibrillin-2の機能に不可欠なFBN2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FBN2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• fibrillin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびfibrillin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FBN2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  fibrillin-2 HDRプラスミド（h）および fibrillin-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFBN2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFBN2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。