FEM1B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420316

개요

Fem1b는 유비퀴틴 의존적 단백질 항상성(proteostasis)과 세포 스트레스 반응에 관여하는, 진화적으로 보존된 앙키린 반복(ankyrin repeat) 포함 단백질인 FEM1B를 암호화합니다. FEM1B는 E3 유비퀴틴 리가아제 경로에서 기질 인식과 연관되어 있으며, 아폽토시스와 세포주기 관련 과정의 조절에 기여하고 그 하위 영향으로 미토콘드리아 항상성과 대사 신호전달에도 영향을 미칩니다. 마우스 모델에서는 Fem1b 기능이 에너지 균형, 내분비 조절, 조직 유지 등의 맥락에서 연구되어 왔으며, 대사 기능장애와 스트레스 적응성 표현형의 기전 연구에 유의미합니다. 또한 FEM1B 활성의 변화는 단백질 품질 관리 네트워크의 변동과도 연관되어, 퇴행성 및 대사성 질환 모델에 대한 감수성에 영향을 줄 수 있는 것으로 보고되었습니다.

FEM1B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Fem1b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Fem1b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Fem1b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FEM1B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FEM1B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Fem1b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FEM1B 기능에 중요한 Fem1b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Fem1b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FEM1B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 FEM1B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Fem1b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FEM1B HDR 플라스미드 (m) 및 FEM1B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Fem1b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Fem1b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.