Fe65 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403226

개요

APBB1는 어댑터 단백질인 Fe65를 암호화하며, Fe65는 신경세포에 풍부하게 발현되는 아밀로이드 전구체 단백질(APP) 상호작용 인자로서 막 수송을 핵 신호전달과 연결한다. Fe65는 PTB 도메인을 통해 APP 및 관련 수용체에 결합함으로써 APP 처리 과정과 엔도사이토시스 경로에 관여하고, AICD 및 전사 조절인자와 같은 요소들과 다단백질 복합체를 형성하여 유전자 발현에 영향을 준다. 이러한 상호작용을 통해 Fe65는 시냅스 기능, 세포골격 역학, 그리고 조절된 단백질 분해(프로테올리시스)를 연결하며, 이들 과정은 신경퇴행 연구에서 자주 탐구되는 주제이다. APP–Fe65 신호전달의 변화와 그 하위 전사 프로그램은 알츠하이머병 관련 기전 및 보다 광범위한 신경세포 스트레스 반응의 맥락에서 연구되어 왔다.

Fe65 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 APBB1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 APBB1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 APBB1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Fe65 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Fe65 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 APBB1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Fe65 기능에 중요한 APBB1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 APBB1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Fe65 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Fe65 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 APBB1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Fe65 HDR 플라스미드 (h) 및 Fe65 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 APBB1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 APBB1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.