FBL4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407372

개요

FBXL4는 F-box 및 류신 반복(leucine-rich repeat) 단백질(FBL4)을 암호화하며, 이 단백질은 SCF(SKP1–CUL1–F-box) E3 유비퀴틴 리가아제 복합체에서 기질(서브스트레이트) 인식 구성요소로 기능하여 특정 단백질을 유비퀴틴화 및 프로테아좀 분해로 연결하는 데 기여합니다. 조절된 단백질 분해를 통해 FBL4는 미토콘드리아 항상성, 에너지 대사, 스트레스 반응에 영향을 미치는 세포 단백질 항상성(proteostasis) 프로그램에 관여합니다. FBXL4의 병원성 변이는 산화적 인산화 장애와 미토콘드리아 네트워크 무결성 붕괴를 특징으로 하는 중증 미토콘드리아 뇌근병증(encephalomyopathy) 표현형과 연관되어 왔습니다. 이러한 특징으로 인해 FBXL4는 인간 세포에서 유비퀴틴 매개 경로가 미토콘드리아 생합성 및 품질 관리(quality control)와 어떻게 교차하는지를 규명하는 데 중요한 표적입니다.

FBL4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FBXL4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FBXL4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FBXL4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FBL4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FBL4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FBXL4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FBL4 기능에 중요한 FBXL4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FBXL4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FBL4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FBL4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FBXL4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FBL4 HDR 플라스미드 (h) 및 FBL4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FBXL4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FBXL4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.