FAS Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420287-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FASO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FAS (m) e o Plasmídeo Double Nickase FAS (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Fas. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FAS Anticorpo (C236): sc-21730
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAS Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420287-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FAS Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420287-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Fas codifica o receptor de morte FAS (CD95/TNFRSF6), um iniciador central da apoptose extrínseca após a ligação do ligante de FAS e a montagem do complexo de sinalização indutor de morte. A ativação do receptor recruta FADD e promove a ativação da caspase-8, conectando-se às caspases efetoras a jusante e, em alguns contextos, à amplificação mitocondrial via clivagem de BID. Além da apoptose, a sinalização por FAS pode cruzar-se com as vias de NF-κB e MAPK, influenciando a homeostase imune, a tolerância periférica e a inflamação. A atividade desregulada de FAS está implicada em falhas na deleção de linfócitos, fenótipos autoimunes e suscetibilidade alterada à evasão imune por tumores, tornando o Fas de camundongo um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos de imunologia e morte celular.
FAS O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Fas em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Fas. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Fas. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Fas interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.