Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FANCI Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402229-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FANCIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FANCI (h) e o Plasmídeo Double Nickase FANCI (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FANCI. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FANCI Anticorpo (A-7): sc-271316
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FANCI Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402229-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FANCI Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402229-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FANCI codifica um componente central da via de reparo de DNA da anemia de Fanconi (AF), que preserva a estabilidade do genoma durante a replicação do DNA. Diante de estresse replicativo ou de lesões por ligações cruzadas intercadeias, FANCI forma um heterodímero com FANCD2 e é monoubiquitinada para promover o recrutamento de fatores de reparo a jusante envolvidos no processamento nucleolítico coordenado, na síntese por translesão e na recombinação homóloga. Por meio dessas funções, FANCI contribui para a proteção de forquilhas de replicação estagnadas, para a sinalização do checkpoint da fase S e para a supressão de aberrações cromossômicas. A disrupção de genes da via de AF, incluindo FANCI, está associada à anemia de Fanconi e a defeitos de reparo de DNA mais amplos e relevantes para o câncer, tornando FANCI um ponto útil para estudar mecanismos de instabilidade genômica.
FANCI O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FANCI em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FANCI. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FANCI. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FANCI interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.