FANCF CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406909

概要

FANCFは、ファンコニ貧血（FA）DNA修復経路の中核構成要素をコードしており、FANCD2およびFANCIのモノユビキチン化を担うFAコア複合体の形成と安定化を助けます。この修飾は、DNAの鎖間架橋の修復を協調的に進めるとともに、相同組換えやチェックポイントシグナルとのクロストークを介して複製フォークの保護を促進します。FANCFの機能はS期におけるゲノム安定性の維持に寄与し、FA経路活性の喪失や制御異常は、染色体不安定性や複製ストレスに対する応答の変化と関連します。FANCFを含むFA遺伝子の遺伝学的欠損はファンコニ貧血の病態と関係しており、DNA損傷耐性機構の観点から広く研究されています。

FANCF CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFANCF遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FANCF内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FANCFのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FANCFタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FANCFシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FANCF欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FANCFの機能に不可欠なFANCFエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FANCFゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FANCF CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFANCF CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FANCF遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FANCF HDRプラスミド（h）および FANCF HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFANCFホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFANCF標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。