FAM83B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415158

Visão geral

FAM83B (família com similaridade de sequência 83, membro B) é um adaptador de sinalização citoplasmático implicado na amplificação dos sinais de saída de receptores tirosina-quinase e na atividade da via MAPK/ERK a jusante, sustentando programas de proliferação e sobrevivência em células epiteliais. Tem sido associado à modulação da dinâmica de sinalização EGFR/RAS e à comunicação cruzada com processos ligados à PI3K, influenciando respostas transcricionais e a progressão do ciclo celular. A expressão desregulada de FAM83B foi relatada em múltiplos contextos tumorais e é estudada como contribuinte para a robustez da sinalização oncogênica, fenótipos de tolerância a terapias e alterações na dependência de fatores de crescimento. Essas características fazem de FAM83B um nó útil para dissecar a arquitetura das vias, o controle por feedback e as relações genótipo–fenótipo em modelos de biologia do câncer.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FAM83B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FAM83B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FAM83B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FAM83B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FAM83B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FAM83B para a investigação da sinalização de FAM83B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FAM83B críticos para a função FAM83B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FAM83B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FAM83B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FAM83B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FAM83B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FAM83B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FAM83B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FAM83B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FAM83B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.