Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
F4/80 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420168
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- F4/80 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico F4/80, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:F4/80 Anticorpo (C-7): sc-377009
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
F4/80 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420168 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adgre1 codifica o antígeno murino F4/80 (EMR1), um receptor de adesão acoplado à proteína G da família EGF-TM7, expresso de forma proeminente em macrófagos residentes em tecidos e em populações mieloides relacionadas. O F4/80 é comumente utilizado para identificar subtipos de macrófagos e tem sido implicado na regulação da diferenciação de macrófagos, da localização nos tecidos e da homeostase imune por meio de interações célula–célula e da detecção de sinais ambientais. Seus padrões de expressão se sobrepõem a vias que controlam a ativação imune inata, a apresentação de antígenos e redes de citocinas inflamatórias nos microambientes teciduais. Alterações na abundância ou na polarização de macrófagos associadas à expressão de Adgre1/F4/80 são frequentemente estudadas em doenças inflamatórias, doenças metabólicas, biologia de infecções, neuroinflamação e biologia de macrófagos associados a tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO F4/80 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adgre1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adgre1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adgre1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína F4/80.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adgre1 para a investigação da sinalização de F4/80, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adgre1 críticos para a função F4/80
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adgre1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo F4/80 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo F4/80 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adgre1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo F4/80 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR F4/80 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adgre1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adgre1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.