ERRγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-416300

概要

ESRRGは、エストロゲン関連受容体ガンマ（ERRγ）をコードしており、リガンド非依存性の転写因子として機能するオーファン核内受容体です。ERRγはミトコンドリア生合成、酸化的リン酸化、ならびに細胞のエネルギー恒常性を制御します。ERRγはPGC-1共役因子と協調して、脂肪酸酸化、TCA回路活性、呼吸鎖の組み立てに関与する遺伝子プログラムを制御し、転写制御を代謝適応と結び付けます。さらに、心臓や神経系を含む組織特異的な分化プログラムにも関与し、内分泌およびストレス応答性のシグナル伝達ネットワークを調節します。ESRRG/ERRγ活性の制御異常は、複数の疾患関連モデルで観察される代謝リモデリングや生体エネルギー状態の変化と関連づけられており、システムバイオロジー研究における機構的な結節点としての利用を支持しています。

ERRγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるESRRG遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ESRRG内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ESRRGのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ERRγタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ERRγシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ESRRG欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ERRγの機能に不可欠なESRRGエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ESRRGゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ERRγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびERRγ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ESRRG遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ERRγ HDRプラスミド（h）および ERRγ HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはESRRGホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のESRRG標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。