ERK 2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400043-NIC

MAPK1은 정형적인 RAS–RAF–MEK–ERK MAPK 카스케이드에서 핵심 세린/트레오닌 키나아제인 ERK2를 암호화하며, 세포외 성장 신호를 인산화에 의해 구동되는 전사 프로그램으로 전환합니다. ERK2는 전사인자와 염색질 연관 조절인자를 포함해 세포질과 핵 내 다양한 기질을 통해 세포주기 진행, 분화, 생존, 이동, 스트레스 반응을 조절합니다. ERK 신호의 이상 조절은 암 생물학에서 비정상적인 증식 신호와 흔히 연관되며, 경로 피드백과 크로스톡의 변화로 인해 염증성 질환과 신경퇴행성 질환의 기전에 기여하기도 합니다. ERK2는 중심 신호 노드로서, 경로 역학, 피드백 조절, 맥락 의존적 신호 출력 등을 규명하는 데 널리 활용됩니다.

ERK 2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 MAPK1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 MAPK1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 MAPK1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, MAPK1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.