EpoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420210
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EpoR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EpoR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EpoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420210 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Epor codifica o recetor de eritropoietina (EpoR), um recetor de citocinas do tipo I essencial para a sobrevivência, proliferação e diferenciação de progenitores eritroides na hematopoiese do rato. A dimerização do recetor induzida pelo ligando ativa a JAK2 e a sinalização a jusante de STAT5, com acoplamento adicional às vias PI3K–AKT e MAPK/ERK, que regulam programas antiapoptóticos e do ciclo celular. A atividade do EpoR molda as respostas à sinalização de eritropoietina induzida por hipoxia e integra-se em redes mais amplas de citocinas na medula óssea e no baço. A sinalização desregulada da via EPOR é amplamente utilizada como modelo para estudar defeitos da eritropoiese, perturbações na sinalização de recetores de citocinas e mecanismos de eritropoiese de stress relevantes para anemia e fenótipos de hiperproliferação eritroide.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EpoR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Epor em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Epor, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Epor na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EpoR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Epor para a investigação da sinalização de EpoR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Epor críticos para a função EpoR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Epor para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EpoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo EpoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Epor. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EpoR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR EpoR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Epor para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Epor definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.