ephrin-B2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400777-LAC

EFNB2 kodiert Ephrin-B2, einen membrangebundenen Liganden für EphB-Rezeptor-Tyrosinkinasen, der eine bidirektionale Zell-Zell-Signalübertragung über Ephrin-„Reverse Signaling“ und Eph-„Forward Signaling“ vermittelt. Diese Achse reguliert angiogenes Aussprossen, die arterio-venöse Spezifikation, die neuronale und kardiale Morphogenese sowie die Ausbildung von Gewebegrenzen, indem sie über Signalwege wie Rho-Familien-GTPasen, MAPK/ERK, PI3K/AKT und Src/FAK die Umorganisation des Zytoskeletts, Adhäsionsdynamik und gerichtete Migration koordiniert. Eine fehlregulierte EFNB2–EphB-Signalgebung wurde mit aberrantem vaskulärem Remodeling und inflammatorischem Crosstalk im Mikromilieu in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext der Tumorangiogenese, metastaseassoziierter Invasionsprogramme und entwicklungsbedingter Gefäßdefekte untersucht. EFNB2-Expression und der Signalzustand von Ephrin-B2 werden daher häufig in Modellen der Endothelbiologie, neurovaskulärer Interaktionen und der Organogenese profiliert.

ephrin-B2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente EFNB2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ephrin-B2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der EFNB2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ephrin-B2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen EFNB2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.