EphA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400535-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EphA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EphA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPHA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphA2 Anticorpo (C-3): sc-398832
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400535-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400535-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHA2 codifica a EphA2, uma tirosina-quinase receptora da família das efrinas que medeia sinalização dependente de contacto para regular a adesão celular, a repulsão e a formação de fronteiras. A ativação de EphA2 dependente de ligando e a comunicação cruzada com as vias PI3K–AKT, MAPK/ERK, GTPases Rho e adesão focal influenciam a dinâmica do citoesqueleto, a migração e a proliferação. Em contextos epiteliais e endoteliais, EphA2 contribui para a arquitetura tecidular e para respostas angiogénicas, e alterações na expressão ou na sinalização têm sido associadas a crescimento desregulado e fenótipos invasivos em múltiplos modelos de doença. Estas propriedades tornam o EPHA2 um nó útil para dissecar a sinalização de quinases receptoras, a comunicação célula–célula e a remodelação impulsionada pelo microambiente.
EphA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPHA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPHA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPHA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPHA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.