Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmidi CRISPR (h)
- Specie Target: human
- I plasmidi CRISPR/Cas9 KO consistono in sequenze RNA guida di 20 nt specifici EPAS-1/HIF-2 alpha derivate dalla libreria GeCKO (v2)
- Per il silenziamento genico CRISPR, le sequenze gRNA indirizzano la proteina CAS9 ad indurre una doppia rottura sito-specifica dei filamenti (DSB) nel DNA genomico
- Plasmidi CRISPR Target-specifici sia per knockout genico che attivazione sono disponibili. Si prega di fare riferimento alle informazioni dettagliate nelle schede tecniche dei prodotti below
- Il Knockdown genico o l'attivazione possono essere analizzati utilizzando EPAS-1/HIF-2 alpha Antibody (190b): sc-13596
- Tutti i prodotti sono venduti come DNA plasmidico purificato, pronto per la trasfezione, con l'esclusione delle particelle lentivirali d'attivazione che sono state preimpacchettate come Particelle lentivirali per l'utilizzo in cellule di difficile trasfezione
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Informazioni ordini
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
Plasmidi Doppia Nickasi
Plasmidi di Attivazione CRISPR
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I plasmidi di KO CRISPR/Cas9, Double Nickase e di attivazione CRISPR/dCas9 sono considerati un "Licensed Product" e sono da utilizzare in accordo con la Licenza Limitata/Etichetta click here.
Description
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) consiste di un pool di tre plasmidi ciascuno codificante per la nucleasi Cas9 e un RNA guida 20 nt specifico EPAS-1/HIF-2 alpha (gRNA) disegnato per una massima efficienza di knockout
- le sequenze gRNA sono derivate dalla libreria GeCKO (v2) e dirigono la proteina Cas9 ad indurre un rottura double strand (DSB) sito-specifica nel DNA genomico (%link_11%)
- Per la selezione delle cellule contenenti un DSB indotto con successo da Cas-9, è raccomandata la co-trasfezione con il EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide HDR (h) (sc-400647-HDR).
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: EPAS-1/HIF-2 alpha Antibody (190b): sc-13596
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Description
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide HDR (h) è raccomandato per co-trasfezione con EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide CRISPR/Cas9 KO (h)
- EPAS-1/HIF-2 alpha HDR Plasmid (h) consiste in un pool di 2-3 plasmidi, ciascuno contenente un templato per riparazione di DNA homology-directed (HDR) corrispondente ai siti di taglio generati dal EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide CRISPR/Cas9 KO (h)
- Ciascun plasmide HDR contiene due braccia di omologia da 800 bp disegnate per legare specificamente il DNA genomico che circonda il corrispondente sito di rottura DNA double strand indotto dal Cas9
- Ciascun Plasmide HDR inserisce un gene di resistenza alla puromicina per inattivare la selezione di cellule stabilmente knockout (KO) ed un gene RFP (Red Fluorescent Protein) per verificare visivamente la trasfezione
- Il gene per la resistenza alla puromicina e per RFP sono affiancati da due siti LoxP per permettere l'ulteriore processamento da parte del Cre Vector sc-418923
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- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- I gRNA codificati da EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide Double Nickase (h2) differiscono dai gRNA in EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide Double Nickase (h)
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: EPAS-1/HIF-2 alpha Antibody (190b): sc-13596
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- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide di attivazione CRISPR (h) è un mediatore sinergico di attivazione (SAM) del sistema di attivazione trascrizionale disegnato per upregolare specificatamente l'espressione genica
- EPAS-1/HIF-2 alpha CRISPR Activation Plasmid (h) consiste di tre plasmidi in proporzione 1:1:1 : un plasmide che codifica la nucleasi (D10A and N863A) Cas9 (dCas9) deattivata fusa al dominio di transattivazione VP64, ed un gene di resistenza alla blasticina; un plasmide che codifica per la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, ed un gene di resistenza all'igromicina;un plasmide che codifica un RNA guida di 20 nt target specifico, e un gene di resistenza alla puromicina.
- Il complesso SAM legae una regione sito-specifica circa 200-250 nt a monte del sito di start trascrizionale e fornisce un robusto reclutamento di fattori trascrizionali per un'attivazione altamente efficiente del gene target
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: EPAS-1/HIF-2 alpha Antibody (190b): sc-13596
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Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-400647 | 20 µg | $397.00 | |||
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide HDR (h) | sc-400647-HDR | 20 µg | $445.00 | |||
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide Double Nickase (h) | sc-400647-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400647-NIC-2 | 20 µg | $410.00 | |||
EPAS-1/HIF-2 alpha Plasmide di attivazione CRISPR (h) | sc-400647-ACT | 20 µg | $397.00 |