Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ENX-1双切口酶质粒(m): sc-420259-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ENX-1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ENX-1双切酶质粒（m）和ENX-1双切酶质粒（m2）编码针对Ezh2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ENX-1: sc-137255，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ENX-1双切口酶质粒(m) | sc-420259-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENX-1双切口酶质粒(m2) | sc-420259-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Ezh2 编码组蛋白甲基转移酶 ENX-1，它是多梳抑制复合体 2（PRC2）的催化核心。PRC2 负责沉积 H3K27me3，从而在发育与细胞命运决定过程中建立并维持稳定的转录沉默。通过 PRC2 介导的染色质压缩，ENX-1 影响谱系承诺程序、细胞周期调控以及与分化相关的基因网络，并与其他表观遗传调控因子和转录因子协同作用，以维持抑制性染色质状态。EZH2/ENX-1 活性失调与染色质图谱改变及异常基因表达程序相关，这些现象在多种癌症与发育生物学模型中均有观察到，因此它是研究增殖与身份（细胞命运）表观遗传控制的关键节点。在小鼠体系中，扰动 Ezh2 常被用于解析多梳依赖通路，包括干细胞维持、免疫细胞分化以及神经发育相关的基因调控。
ENX-1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Ezh2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ezh2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Ezh2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Ezh2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。